Arnaud Fontbonne

Expériences

Projets:
Cellules souches et thérapie cellulaire de la surdité neurosensorielle - Projet ANR (Blanc SVSE 1 2010)
Human stem cells for treatment of hearing loss - Projet européen OTOSTEM (FP7-HEALTH-2013-INNOVATION)
Techniques : Culture d'hiPSC, microdissection, culture organotypique, coupes au cryostat, immunofluorescence, microscopie confocale (logiciel ZEN), quantification (logiciel ImageJ), génotypage par PCR, xénogreffe
Tâches effectuées en parallèle : participation à la vie collective du laboratoire ; gestion des stocks, suivi des commandes, création et mise à jour de l'inventaire de l'équipe
Congrès : participation à la création et à la soutenance du poster pour l'IEB 2014 Sheffield, UK
Publication : Smeti I, Watabe I, Savary E, Fontbonne A, Zine A, HMGA2, the architectural transcription factor high mobility group, is expressed in the developing and mature mouse cochlea, PLoS One, 2014

Sujet : Caractérisation de l'expression génique de lignées cellulaires
Développement produits : participation à l'intégration d'un nouveau contrôle dans un kit de détection de leucémies
Techniques : qRT-PCR, extractions ADN et ARN, puces Agilent, culture cellulaire
Ce stage m'a permis d'évoluer dans un contexte de travail sous norme ISO 13485, qui respecte les Bonnes Pratiques de Laboratoire.
Les expériences que j'ai réalisées ont généré des données qui pourront servir de référence à des études ultérieures visant à intégrer un nouveau contrôle dans des kits de diagnostic moléculaire marqués IVD déjà existants.

Sujet de stage : Détermination du type cellulaire exprimant Spatial dans le thymus de souris et première caractérisation chez l'Homme
Techniques utilisées : Western-blot, immunofluorescence, microscopie confocale, PCR, clonage, transfection, culture cellulaire
Les résultats obtenus chez la souris confortent certaines hypothèses faites à partir d'études antérieures.
Chez l'Homme, des résultats inattendus ont été obtenus de façon répétée, soulevant l'hypothèse d'autres fonctions à attribuer à la protéine Spatial.

Sujet : Mise en évidence d'ARN dans les microparticules endothéliales obtenues à partir des cellules de la lignée HMEC-1 : effet de l'activation cellulaire ou de l'apoptose
Techniques : cytométrie de flux, qRT-PCR, ultracentrifugation, ELISA, culture cellulaire

Sujet de stage : Identification d'anticorps monoclonaux dirigés contre des déterminants antigéniques de cellules souches tumorales mammaires
Techniques utilisées : cytométrie de flux, tri cellulaire, génération d'anticorps monoclonaux (AcM) par immunisation de souris, criblage des AcM, culture cellulaire
Le but de mon stage était de mettre au point et de préparer le criblage en double marquage des anticorps monoclonaux par cytométrie de flux, en associant l’analyse simultanée du marqueur enzymatique des cellules souches avec la détection de marqueurs de surface.
J’ai donc sélectionné et cultivé la lignée cellulaire, mis au point la technique de double marquage, titré des anticorps fluorescents secondaires, mesuré la stabilité de l’analyse en cytométrie de flux et enfin criblé les anticorps produits par les hybridomes en culture.

Formations

Compétences

Ingénieur en Biologie